Tiocianatul de guanidină 593-84-0 facilitează extracția nucleotidelor și peptidelor din viscerele animalelor

Tiocianat de guanidină | 593-84-0 | este un puternic denaturant proteic. Este o pulbere cristalină albă, iritantă și sensibilă la lumină. Este solubil în etanol și apă, cu un punct de topire de 118℃. Tiocianatul de guanidină este utilizat în principal pentru denaturare, liza celulelor și extracția ARN și ADN. Este o componentă chimică obișnuită pentru extracția acidului nucleic.

Brevetul cn111500664a dezvăluie o metodă pentru extragerea nucleotidelor și polipeptidelor din viscerele animale folosind tiocianat de guanidină. Nucleotidele sunt compuși compuși din bază purinică sau bază pirimidinică, riboză sau dezoxiriboză și acid fosforic, care sunt utilizate pe scară largă în medicină, produse pentru mamă și copil, condimente și aditivi alimentari. Polipeptida este Î ± - Compușii formați din aminoacizi legați între ei prin legături peptidice sunt produse intermediare ale hidrolizei proteinelor, implicând diferite domenii ale hormonilor umani, nervilor, creșterii și reproducerii celulare. Importanța lor constă în reglarea funcțiilor fiziologice ale diferitelor sisteme și celule din corp, activarea enzimelor relevante din organism, promovarea permeabilității membranei metabolice intermediare sau controlul transcrierii ADN-ului sau afectarea sintezei proteinelor specifice, în cele din urmă produc efecte fiziologice specifice.

Viscerele animalelor sunt bogate în nucleotide și peptide, dar în prezent, extracția nucleotidelor și peptidelor se realizează în mare parte separat, rezultând risipa de resurse și procese complexe. Tiocianatul de guanidină este util pentru extragerea nucleotidelor și peptidelor din viscerele animalelor. Metodele specifice sunt următoarele:

Mai întâi, spălați viscerele animalelor proaspete, scurgeți-le, tăiați-le, apoi sfărâmați-le, adăugați apă deionizată pentru a obține soluția mixtă, apoi adăugați soluția de guanidină tiocianat la soluția mixtă, vibrați și amestecați bine și apoi stați în picioare. Apoi, i se adaugă un purtător care conține silice, deoarece tiocianatul de guanidină va cliva celulele, iar nucleotidele eliberate din celule vor fi combinate cu purtătorul de silice. Scoateți purtătorul care conține silice, absorbiți-l și separați-l cu eluant pentru a obține nucleotide purificate.

Apoi, soluția de NaCl se adaugă la soluția reziduală din care a fost scos purtătorul de silice, soluția amestecată este extrasă, apoi se adaugă protează compozită, apoi se efectuează hidroliza enzimatică la microunde, soluția de hidroliză enzimatică este încălzită într-o baie de apă. , centrifugat, se ia supernatantul, iar polipeptida este obţinută după liofilizare.

Această metodă folosește caracteristicile conform cărora tiocianatul de guanidină poate distruge structura celulară și poate denatura proteina. Nu numai că poate extrage nucleotide și peptide succesiv, dar are și avantajele unei metode simple și a unei eficiențe ridicate. În același timp, evită și problema reacției dintre reactivii biochimici atunci când se adaugă reactivi biochimici pentru extracție.